Matusiak jest wychowankiem Widzewa Łódź. Od sezonu 1999/00 do 2001/02 grał w Łódzkim KS-ie. Zadebiutował w nim 6 października 1999 r. w meczu Pucharu Ligi z Legią Warszawa (1:1). W Ekstraklasie pierwszy mecz rozegrał natomiast 4 marca 2000 r. Było to spotkanie z Legią (1:1). Swoją pierwszą bramkę dla łódzkiego zespołu zdobył 19 września 2001 r. w meczu Pucharu Polski z Kaszubią Kościerzyna (3:1).

Następnie, Matusiak przeniósł się na jedną rundę (jesienną) sezonu 2002/2003 do Szczakowianki Jaworzno. Zadebiutował w niej 4 sierpnia 2002 r. w meczu z Wisłą Kraków (1:1). Rozegrał tam 11 spotkań w Ekstraklasie. Wiosną wrócił do ŁKS-u. Wtedy też strzelił swoją pierwszą bramkę ligową - było to 30 kwietnia 2003 r. w meczu z Ruchem Radzionków (1:0).

W sezonie 2003/2004 grał w Wiśle Płock. Zadebiutował w niej 2 sierpnia 2003 r. w meczu II rundy Pucharu Polski z rezerwami Odry Opole (1:2). W barwach płocczan zagrał w 14 spotkaniach w Ekstraklasie.

Od sezonu 2004-2005 był zawodnikiem GKS Bełchatów. W jego barwach zadebiutował 30 lipca 2004 r. w wygranym 2:0 meczu z Ruchem Chorzów. 13 sierpnia strzelił swoją pierwszą bramkę dla bełchatowian - był to mecz z Widzewem (4:1). Udane występy popularnego "RadoMatu" pomogły GKS-owi awansować do Ekstraklasy. W barwach tej drużyny strzelił swoją pierwszą bramkę w najwyższej klasie rozgrywkowej w Polsce - było to 27 sierpnia 2005 r. w meczu z Arką Gdynia (1:1).

W sezonie 2006/2007 Matusiak wraz z kolegami z drużyny zanotował doskonałe występy w rundzie jesiennej (lider grupy jesiennej), co zaowocowało propozycjami z wielu klubów polskich i zagranicznych. Pomimo początkowych deklaracji zawodnika o pozostaniu w klubie z Bełchatowa do końca sezonu, 29 stycznia 2007 r. Radosław Matusiak podpisał 4-letni kontrakt z klubem włoskiej Serie A – US Palermo. Reprezentantowi Polski nie udało się jednak przebić do pierwszego składu włoskiej drużyny. Zagrał w niej tylko w 3 spotkaniach i strzelił 1 bramkę.

W sierpniu 2007 r. podpisał kontrakt z holenderskim SC Heerenveen, gdzie również był tylko rezerwowym. Zagrał tam w 10 spotkaniach i strzelił 1 bramkę. Od rundy wiosennej sezonu 2007/2008 miał zostać wypożyczony do klubu, w którym się wypromował - GKS Bełchatów[1], jednak nie porozumiał się w kwestiach finansowych i ostatecznie nie doszło do podpisania kontraktu[2].

7 lutego 2008 r. został wypożyczony na pół roku do Wisły Kraków. Napastnik miał jednak problemy z przebiciem się do pierwszego składu Wisły, która w tym sezonie zdobyła Mistrzostwo Polski – z 13 wiosennych spotkań wystąpił w ośmiu, przebywając na boisku łącznie 333 minuty i zdobywając jedną bramkę [3] [w meczu z Jagiellonią Białystok (2:1 - 12 kwietnia 2008 r.)]. Grał również w finale Remes Pucharu Polski w 2008 roku, który Wisła przegrała z Legią Warszawa (0:0 - 3:4 w rzutach karnych). 29 sierpnia 2008 r. rozwiązał kontrakt z Heerenveen i od tego czasu pozostawał wolnym zawodnikiem. Mimo wielu informacji w mediach Matusiak wielokrotnie podkreślał, że nie zakończył swojej kariery, a przerwa spowodowana była koniecznością wyleczenia kontuzji.

23 grudnia 2008 r. Matusiak podpisał kontrakt z Widzewem Łódź.